*Todos os projetos são financiados pelo Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico-CNPq, Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior-CAPES e Fundação de Amparo á Pesquisa de Minas Gerais-FAPEMIG
EFEITOS
DA RADIAÇÃO EMITIDA PELOS APARELHOS DE TELEFONE CELULAR NAS GLÂNDULAS PARÓTIDAS
Pesquisadores envolvidos: Fabrício
Tinôco Alvim de Souza (doutorado), Ricardo Santiago Gomez (orientador), Carolina
Cavaliéri Gomes (co-orientadora), Jeane de Fátima Correia-Silva
(co-orientadora)
A radiação emitida por telefones celulares tem gerado grande discussão como possível fator carcinogênico para as glândulas parótidas. Na literatura existem trabalhos com resultados controversos até o presente momento sobre este assunto. Esta pesquisa visa avaliar os efeitos do uso do telefone celular nas glândulas parótidas. Serão avaliados acadêmicos do curso de odontologia que foram previamente selecionados através de um questionário e agrupados entre os que usavam diariamente e por maior período o telefone celular. Serão investigados os efeitos da radiação emitida pelos telefones celulares sobre genes relacionados ao ciclo celular. Os resultados deste estudo ajudarão elucidar os eventos relacionados ao uso de telefones celulares sobre as glândulas parótidas.
ANÁLISE
DO GENE PRKAR1A EM TUMORES
ODONTOGÊNICOS
Pesquisadores envolvidos: Sílvia
Ferreira de Sousa (doutorado); Vanessa Fátima Bernardes (pos-doutorado);
Carolina Cavaliéri Gomes (orientadora)
Os tumores odontogênicos compreendem um
grupo de lesões raras que derivam dos tecidos que formam os dentes. O gene
PRKAR1A codifica a subunidade regulatória RI-α da proteína kinase A (PKA) e
está envolvido no controle da proliferação celular e diferenciação O estudo de
Perdigão et al. (2005) demonstrou a participação da alteração molecular do
PRKAR1A na patogênese do mixoma odontogênico, no entanto, até o momento, nenhum
estudo investigou alterações do gene PRKAR1A em outros tumores odontogênicos,
sejam eles ectomesenquimais, mistos ou epiteliais. Objetivo: O objetivo deste
estudo é investigar alterações no gene PRKAR1A em tumores odontogênicos.
Metodologia: Pacientes da Clínica de Patologia e Semiologia Odontológicas da
Faculdade de Odontologia da UFMG com diagnóstico de tumor odontogênico serão
convidados a participar deste estudo. Serão coletadas amostras de tumores
odontogênicos obtidas após biópsia incisional ou excisional. As amostras
coletadas serão processadas e analisadas para a avaliação de parâmetros
moleculares. Serão investigadas nas amostras alteração do PRKAR1A em nível de
DNA, RNA mensageiro e expressão protéica. Será realizado estudo de perda de
heterozigosidade da região do gene para 5 marcadores microsatélites, análise
imunoistoquímica da subunidade R1-α da PKA, análise da expressão gênica por PCR
quantitativo em tempo real e presença de mutações no gene PRKAR1A por
sequenciamento direto dos éxons.
A via PKA/cAMP está envolvida no
controle do metabolismo, proliferação celular, diferenciação e apoptose. Quando
o gene PRKAR1A está alterado, ocorre um aumento na transcrição dos genes
responsáveis pela proliferação celular.
INVESTIGAÇÃO
DA PERDA DE HETEROZIGOSIDADE DE GENES SUPRESSORES DE TUMOR EM NEUROMA
ENCAPSULADO EM PALIÇADA
Pesquisadores envolvidos: Leonardo
Nogueira Rodrigues (iniciação científica), Clarice Ferreira Galvão (mestrado), Carolina
Cavaliéri Gomes (co-orientadora), Ricardo Santiago Gomez (orientador)
O neuroma encapsulado em paliçada é uma
lesão reacional com etiologia incerta que acomete frequentemente a região da
face, pescoço e mucosa oral de indivíduos adultos entre a 5ª e 7ª década de
vida, sem predileção por sexo. Clinicamente a lesão é bem circunscrita, séssil,
com um tamanho de 2 a 3 mm, firme, solitária e assintomática.
Histopatologicamente a lesão é frequentemente encapsulada, embora a cápsula
possa ser incompleta. O objetivo deste trabalho é avaliar a perda de
heterozigosidade (Loss of Heterozygosity- LOH) em regiões de microssatélites
próximas a genes supressores de tumor através da análise de DNA, normal e
tumoral, das amostras selecionadas. Para isso, será selecionado um painel de
marcadores para regiões supressoras de tumor e DNA será extraído e amplificado
através da reação em cadeia da polimerase (Polymerase chain reaction- PCR). Os
produtos de PCR amplificados serão revelados em gel de poliacrilamida a 8% e
posteriormente analisados por eletroforese capilar no equipamento ABI-PRISM 310
(Applied Biosystems, Foster City, CA, USA).
LOH é considerada quando um alelo (pico) na amostra de tumor for menor
em mais do que 50% quando comprado com a amostra normal. A LOH é calculada
baseando-se no valor da altura do alelo 1 sobre a altura do alelo 2 nas
amostras de tecido normal, dividido pela
altura do alelo 1 sobre a altura do alelo 2 nas amostras de tecido tumoral(VAN HOUTEN et al.,
2000). Os resultados que apresentarem valores <0,5 ou > 2 serão
considerados LOH.
INFUÊNCIA
DE MECANISMOS EPIGENÉTICOS SOBRE O GENE INF-ϒ NAS LESÕES DE GRANULOMA
PERIAPICAL E CISTO RADICULAR
Pesquisadores envolvidos: Kelma Campos
(doutorado), Ricardo Santiago Gomez (orientador)
O Granuloma Periapical e o Cisto
Radicular são lesões inflamatórias crônicas formadas em resposta à necrose do
tecido pulpar e visam conter a disseminação dos microrganismos para região
periapical, sendo detectadas, radiograficamente, pela formação de uma área
radiolúcida próxima ao ápice radicular do dente afetado que caracteriza a perda
óssea na região, estimulada pela ação de determinadas citocinas. O objetivo do
nosso estudo é avaliar a expressão do Interferon Gamma nas lesões de Granuloma
Dentário e Cisto Radicular, além da possível influência da Metilação e de
microRNAs 146a e 155 sobre a expressão deste gene. As lesões periapicais
coletadas serão submetidas ao exame histopatológico e após a extração do DNA
será realizado a Methylaton-specific polymerase chain reaction (MSP) para
verificar o padrão de Metilação. A expressão do mRNA do Interferon Gamma e dos
microRNAs 146a e 155 será analisada
através do Quantitative Polymerase chain reactions (qPCR) usando o RNA isolado
de parte das amostras coletadas e a expressão da proteína Interferon Gamma será
verificada através da Imunoistoquímica.
ESTUDO DA PERDA DE HETEROZIGOSIDADE EM
QUEILITE ACTÍNICA E CARCINOMA DE CÉLULAS ESCAMOSAS DE LÁBIO
Pesquisadores envolvidos: Gefter Thiago
Batista Correa (doutorado), Lissur Azevedo Orsine (iniciação científica), Vanessa
Fátima Bernardes (co-orientadora), Carolina Cavaliéri Gomes (orientadora)
O lábio é considerado uma região de
frequente desenvolvimento de carcinoma, correspondendo a 30% dos carcinomas de
cavidade oral e 2.06% de todas as neoplasias humanas. Embora vários estudos venham sido feitos no
intuito de elucidar a patogênese do carcinoma de células escamosas de lábio
(CCEL), os mecanismos moleculares envolvidos na ocorrência do CCEL necessitam
ser melhor elucidados. A Queilite actínica é uma lesão cancerizável do lábio
que apresenta fatores etiológicos e clínicos semelhantes aos do CCEL, (ABREU et al.,
2006). Como as alterações
moleculares do CCEL e da queilite actínica ainda não estão bem descritas, o
objetivo do presente estudo é investigar em CCEL e queilite actínica a perda de
heterozigosidade em regiões genômicas que previamente demonstraram alta
frequência de perda alélica em uma ampla gama de neoplasias epiteliais
malignas, incluindo o carcinoma de células escamosas intra-oral. Pretende-se
neste estudo verificar se a LOH nas regiões estudadas são eventos frequentes no
CCEL e se a queilite actínica compartilha das mesmas alterações moleculares do
CCEL. Pretende-se ainda investigar a associação entre a LOH em locus
específicos e fatores prognósticos específicos do CCEL, como o tamanho do
tumor, presença de metástase regional e tempo de sobrevida livre de doença. Os
resultados obtidos serão analisados e divulgados em forma de artigo científico
e apresentação em eventos científicos.
AÇÃO
FARMACOLÓGICA DAS ω-TOXINAS
DA FRAÇÃO TX3 OBTIDA DO
VENENO DA ARANHA PHONEUTRIA NIGRIVENTER
NA VIA NOCICEPTIVA TRIGEMINAL
Pesquisadores envolvidos: Elizete Maria
Rita Pereira (doutorado), Marcus Vinicius Gomez (orientador), Ricardo Santiago
Gomez (co-orientador)
Os atuais medicamentos para o tratamento
da dor podem ou não causar analgesia em alguns indivíduos. Além disso, eles
estão associados a efeitos adversos intoleráveis quando utilizados por tempo
prolongado. A promissora ação farmacológica das ω-toxinas da fração Tx3 obtida
do veneno da aranha Phoneutria
nigriventer no campo de pesquisa da dor tem sido, até o presente momento,
demonstrada de uma forma geral. Assim, este estudo tem como objetivo avaliar os
mecanismos de ação das toxinas da fração Tx3 obtida do veneno da aranha Phoneutria nigriventer sobre a via
nociceptiva trigeminal. Para isso, será realizada a mensuração de glutamato,
substancia P e CGRP por meio de ensaio imunoenzimático em perfusado de polpa
dental humana pré-tratada com as ω-toxinas derivadas dessa fração Tx3. Também,
será avaliado por microscopia confocal, o efeito do pré-tratamento com essas
toxinas no aumento da [Ca+2]i disparado por KCl
e capsaicina em cultura de neurônios do gânglio trigeminal de
ratos wistar machos submetidos ou não a constrição do nervo infra-orbital. Por fim, o nível de expressão de
múltiplos canais de cálcio ativados por voltagem em neurônios trigeminais, de
animais submetidos à constrição do nervo infra-orbital, será determinado por
western blot.
AVALIAÇÃO
MOLECULAR DE CITOCINAS NA DOENÇA DO ENXERTO CONTRA O HOSPEDEIRO EM PACIENTES
SUBMETIDOS AO TRANSPLANTE DE CÉLULAS- TRONCO HEMATOPOIÉTICAS
Pesquisadores envolvidos: Renata Gonçalves
de Resende (doutorado), Natália Mendes de Matos Cardoso (iniciação científica),
Jeane de Fátima Correia-Silva (co-orientadora), Ricardo Santiago Gomez
(orientador)
O Transplante de Células-Tronco
Hematopoiéticas (TCTH) é estabelecido para o tratamento de diversas doenças
hematológicas ou de outros tecidos, insuficiências medulares ou outros
distúrbios congênitos da hematopoese. Complicações advindas do transplante são
observadas e descritas na literatura podendo ocorrer em todas as fases do
transplante. Uma das complicações que causa elevada morbidade e mortalidade é a
doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH). A DECH pode ser uma reação
catastrófica e fatal onde as células histocompatível imunocompetentes do
enxerto atacam o tecido do hospedeiro. Citocinas pró-inflamatórias e
antiinflamatórias têm sido associadas à mediação e regulação da DECH. Desse
modo, o conhecimento do estado de ativação das células T e de monócitos, além
da expressão de citocinas derivadas dessas células, possibilita o melhor entendimento
dos mecanismos biológicos envolvidos na ocorrência e na modulação da DECH após
o TCTH. O objetivo deste estudo é investigar o estágio de ativação de células T
e de monócitos em pacientes que apresentavam a DECH crônica, bucal e sistêmica,
através da análise da expressão de moléculas relacionadas à ativação, memória e
co-estimulação, assim como avaliar a produção das citocinas provenientes do
sangue periférico de pacientes que apresentam a doença. Serão incluídos neste
estudo, DECH crônica de pacientes submetidos ao alo-TCTH e pacientes controles
saudáveis. A análise fenotípica das células T e monócitos é realizada por
citometria de fluxo.
ESTUDO
DA PERDA DE HETEROZIGOSIDADE EM REGIÕES DE GENES SUPRESSORES DE TUMOR EM
LEUCOPLASIAS BUCAIS
Pesquisadores envolvidos: Thiago Fonseca
Silva (doutorado), Carolina Cavalieri Gomes (orientador)
Segundo a Organização Mundial da Saúde
(OMS) a leucoplasia bucal (LB) é classificada como sendo a principal lesão potencialmente
maligna da boca. Neste contexto, estudos moleculares para rastreamento de
possíveis genes que possam estar envolvidos no processo de carcinogênese vêm
sendo alvo de várias investigações. Instabilidades genéticas são consideradas
fontes potenciais de alterações moleculares em diversos genes associados aos
processos de tumorigênese. Perdas somáticas em locus de genes supressores de
tumor estão associadas a diversos cânceres e podem indicar uma susceptibilidade
genética ao desenvolvimento do câncer. A perda de heterozigosidade (LOH) parece
estar associada com os processos de carcinogênese através de alterações do
padrão de expressão gênica ou mesmo nos eventos de inativação de genes
supressores de tumor. Recentemente foi sugerido que a LOH de algumas regiões
intergênicas poderia estar relacionada com a progressão das LB e
conseqüentemente dos processos de transformação maligna. Essas características
fazem destes mecanismos, alvos atrativos para a melhor compreensão dos eventos
de gênese do câncer de boca. O objetivo deste estudo é investigar a perda de
heterozigosidade (LOH) em marcadores localizados em regiões de genes
supressores de tumor em LB e sua associação com a gradação histológica destas
lesões.
AVALIAÇÃO
DA EXPRESSÃO DE MICRORNAS NA LEUCOPLASIA BUCAL E NO CARCINOMA DE CÉLULAS
ESCAMOSAS DE BOCA
Pesquisadores envolvidos: João Artur
Ricieri Brito (doutorado), Ricardo Santiago Gomez (orientador)
A leucoplasia bucal (LB) é a mais
importante lesão com potecialidade de transformação maligna da cavidade bucal.
A gradação de displasia epitelial na LB tem sido feita levando em consideração
os achados citológicos e histológicos, porém o padrão molecular de cada
parâmetro utilizado nessa gradação não está bem estabelicido assim como sua
implicação na transformação maligna da LB. MicroRNAs (miRNAs) são pequenas
moléculas de RNA não codificantes que possuem a função de regulação
pós-transcricional ou de degradação do RNA menssageiro. O objetivo do presente
estudo é investigar a associação de cada alteração citológica e histológica
usada para gradação da displasia bucal com a expressão de três miRNAs
potencialmente associados com a progressão do câncer bucal. A expressão dos
miRNAs é realizada através de Real-Time PCR (qPCR) em um conjunto de casos de
leucoplasia bucal com diferentes graus de displasia, um conjunto de casos de
carcinoma de células escamosas de boca e de mucosa bucal sem displasia.
